diff --git a/.gitignore b/.gitignore index 6644779..cc7e9f4 100644 --- a/.gitignore +++ b/.gitignore @@ -5,3 +5,4 @@ build dist .cache .coverage +.pytest_cache diff --git a/.travis.yml b/.travis.yml index eee3c46..dc7e421 100644 --- a/.travis.yml +++ b/.travis.yml @@ -1,4 +1,8 @@ language: python +addons: + apt: + packages: + - bowtie2 python: - "2.7" - "3.5" @@ -10,7 +14,7 @@ matrix: - pip install pytest-flake8 - pip install . script: - - pytest --flake8 -m flake8 + - flake8 nuc_processing test setup.py after_success: [] install: - pip install pytest-cov codecov diff --git a/nuc_processing/NucContactMap.py b/nuc_processing/NucContactMap.py index 868defb..4d8827e 100644 --- a/nuc_processing/NucContactMap.py +++ b/nuc_processing/NucContactMap.py @@ -439,7 +439,7 @@ def nuc_contact_map(ncc_path, svg_tag='_contact_map', svg_width=1000, bin_size=5 ni = _get_num_isolated(contact_list) s_a, n_a = chromo_offsets[chr_a] s_b, n_b = chromo_offsets[chr_b] - + for p_a, p_b, ag in contact_list: if chr_a != chr_b: if ('.' in chr_a) and ('.' in chr_b) and (chr_a.split('.')[0] == chr_b.split('.')[0]): diff --git a/nuc_processing/NucProcess.py b/nuc_processing/NucProcess.py index 48575e6..9e24ced 100644 --- a/nuc_processing/NucProcess.py +++ b/nuc_processing/NucProcess.py @@ -42,28 +42,30 @@ from collections import defaultdict from shutil import move from subprocess import Popen, PIPE, call +from functools import partial from .NucSvg import SvgDocument from .NucContactMap import nuc_contact_map +from .common import open_file_r, strip_ext, merge_file_names PROG_NAME = 'nuc_process' VERSION = '1.1.1' DESCRIPTION = 'Chromatin contact paired-read Hi-C processing module for Nuc3D and NucTools' RE_CONF_FILE = 'enzymes.conf' -RE_SITES = {'MboI' : '^GATC_', - 'DpnII' : '^GATC_', - 'AluI' : 'AG^CT', - 'BglII' : 'A^GATC_T', - 'HindIII': 'A^AGCT_T'} +RE_SITES = {'MboI' : '^GATC_', # noqa: E203 + 'DpnII' : '^GATC_', # noqa: E203 + 'AluI' : 'AG^CT', # noqa: E203 + 'BglII' : 'A^GATC_T', # noqa: E203 + 'HindIII': 'A^AGCT_T'} # noqa: E203 QUAL_SCHEMES = ['phred33', 'phred64', 'solexa'] DEFAULT_MIN_QUAL = 10 QUAL_ZERO_ORDS = {'phred33':33, 'phred64':64, 'solexa':64} FASTQ_READ_CHUNK = 1048576 READ_BUFFER = 2**16 +open_file_r = partial(open_file_r, buffering=READ_BUFFER) MIN_READ_LEN = 20 NUM_MAP_FASTAS = 10 SCORE_TAG = re.compile(r'\sAS:i:(\S+)') SCORE_TAG_SEARCH = SCORE_TAG.search -FILENAME_SPLIT_PATT = re.compile('[_\.]') NCC_FORMAT = '%s %d %d %d %d %s %s %d %d %d %d %s %d %d %d\n' LOG_FILE_PATH = None STAT_FILE_PATH = None @@ -94,16 +96,6 @@ RE_SITES[name] = site -def open_file_r(file_path): - - if file_path.endswith('.gz'): - file_obj = gzip.open(file_path, 'rt') - else: - file_obj = open(file_path, 'rU', READ_BUFFER) - - return file_obj - - def compress_file(file_path): in_file_obj = open(file_path, 'rU', READ_BUFFER) @@ -211,54 +203,6 @@ def write_sam_file(ncc_file_path, ref_sam_file_1, ref_sam_file_2): return sam_file_path -def merge_file_names(file_path1, file_path2, sep='_'): - - # same dir, need non truncated name - - dir_name1, file_name1 = os.path.split(file_path1) - dir_name2, file_name2 = os.path.split(file_path2) - - if dir_name1 != dir_name2: - msg = 'Attempt to merge file names for file from different directories' - raise Exception(msg) - - file_root1, file_ext1 = os.path.splitext(file_name1) - file_root2, file_ext2 = os.path.splitext(file_name2) - - if file_ext1 != file_ext2: - msg = 'Attempt to merge file names with different file extensions' - raise Exception(msg) - - parts1 = FILENAME_SPLIT_PATT.split(file_root1) - parts2 = FILENAME_SPLIT_PATT.split(file_root2) - parts3 = [] - - n1 = len(parts1) - n2 = len(parts2) - n = max(n1, n2) - - for i in range(n): - - if (i < n1) and (i < n2): - a = parts1[i] - b = parts2[i] - - parts3.append(a) - if a != b: - parts3.append(b) - - elif i < n1: - parts3.append(parts1[i]) - else: - parts3.append(parts2[i]) - - file_root3 = sep.join(parts3) - - file_path3 = os.path.join(dir_name1, file_root3 + file_ext1) - - return file_path3 - - def remove_promiscuous(ncc_file, num_copies=1, keep_files=True, zip_files=False, resolve_limit=1e3, close_cis=1e4, ambig=False): """ @@ -898,10 +842,10 @@ def count_write(tag, line): # Remove complete excluded ambiguity groups at the end: # - Removes a whole ambiguity group if only one possibilty was suspect as it could be the real contact - - out_file_objs['accepted'].close() + + out_file_objs['accepted'].close() del out_file_objs['accepted'] - + out_file_obj = open(filter_file, 'w') with open_file_r(out_file_names['accepted']) as file_obj: write = out_file_obj.write @@ -1505,7 +1449,7 @@ def map_reads(fastq_file, genome_index, align_exe, num_cpu, ambig, qual_scheme, patt_4 = re.compile('(\d+) \(.+\) aligned >1 times') cmd_args = [align_exe, - '-D', '20', '-R', '3', '-N', '0', '-L', '20', '-i', 'S,1,0.50', + '-D', '20', '-R', '3', '-N', '0', '-L', '20', '-i', 'S,1,0.50', '-x', genome_index, '-k', '2', '--reorder', @@ -1855,7 +1799,7 @@ def get_chromo_re_fragments(fasta_file_objs, contig, sequence, re_site, cut_offs fasta_write = [fo.write for fo in fasta_file_objs] - step = mappability_length/2 + step = mappability_length // 2 site_len = len(re_site) offset_start = site_len - cut_offset frag_start = offset_start @@ -2185,9 +2129,9 @@ def index_genome(base_name, file_names, output_dir, indexer_exe='bowtie2-build', file_name = uncompress_gz_file(file_name) fasta_files.append(file_name) - fasta_file_str = ','.join(fasta_files) + fasta_file_str = ','.join(map(os.path.abspath, fasta_files)) - cmd_args = [indexer_exe, '-f'] + cmd_args = [indexer_exe, '-f', '-c'] if quiet: cmd_args.append('-q') @@ -2199,6 +2143,11 @@ def index_genome(base_name, file_names, output_dir, indexer_exe='bowtie2-build', call(cmd_args, cwd=output_dir) + # Bowtie2 always returns 0, so check if output is produced + status, error = check_index_file(os.path.join(output_dir, base_name)) + if not status: + raise RuntimeError("Bowtie2 failed: " + error) + def get_ligation_junction(re_site): """ @@ -2705,7 +2654,7 @@ def pie_values(data, names): hist, edges = frag_sizes data_set = [(int(edges[i]), int(val)) for i, val in enumerate(hist)] svg_doc.graph(x1, y+chart_height, table_width/2, th-chart_height-40, [data_set], 'Size', 'Count', - names=None, colors=None, graph_type='line', + names=None, colors=None, graph_type='line', symbols=None, line_widths=None, symbol_sizes=None, legend=False, title=None, plot_offset=(80, 20)) y += th @@ -3030,12 +2979,7 @@ def nuc_process(fastq_paths, genome_index, genome_index2, re1, re2=None, sizes=( break else: - file_paths = [] - for fastq_path in fastq_paths: - if fastq_path.lower().endswith('.gz'): - fastq_path = fastq_path[:-3] - - file_paths.append(fastq_path) + file_paths = list(map(partial(strip_ext, ext=".gz"), fastq_paths)) merged_path = merge_file_names(file_paths[0], file_paths[1]) file_root = os.path.splitext(merged_path)[0] diff --git a/nuc_processing/NucSvg.py b/nuc_processing/NucSvg.py index 69a4e97..b89db58 100644 --- a/nuc_processing/NucSvg.py +++ b/nuc_processing/NucSvg.py @@ -465,7 +465,7 @@ def color_func(x, p=pos_color, n=neg_color, b=bg_color): self.text(y_axis_label, (x3, y), anchor='middle', size=font_size, bold=False, font=font, color=line_color, angle=270, vert_align=None) def graph(self, x, y, width, height, data_lists, x_label, y_label, - names=None, colors=None, graph_type=LINE_TYPE, + names=None, colors=None, graph_type=LINE_TYPE, symbols=None, line_widths=None, symbol_sizes=None, legend=False, title=None, x_labels=None, plot_offset=(100, 50), axis_color='black', bg_color='#F0F0F0', font=None, font_size=16, line_width=1, diff --git a/nuc_processing/common.py b/nuc_processing/common.py new file mode 100644 index 0000000..67de7f9 --- /dev/null +++ b/nuc_processing/common.py @@ -0,0 +1,58 @@ +import gzip +import re +import os +try: + from itertools import zip_longest +except ImportError: + # Python 2 + from itertools import izip_longest as zip_longest +from functools import partial + + +def open_file_r(file_path, buffering=-1): + if file_path.endswith('.gz'): + return gzip.open(file_path, 'rt') + else: + return open(file_path, 'rtU', buffering) + + +def strip_ext(name, ext): + if name.endswith(ext): + return name[:-len(ext)] + return name + + +def nwise_longest(iterable, n=2, fillvalue=None): + return zip_longest(*[iter(iterable)] * n, fillvalue=fillvalue) + + +def merge_file_names(file_path1, file_path2, sep='_'): + SPLIT_PATT = re.compile('([_\.])') + + dir_name1, file_name1 = os.path.split(file_path1) + dir_name2, file_name2 = os.path.split(file_path2) + + if dir_name1 != dir_name2: + msg = 'Attempt to merge file names for file from different directories' + raise Exception(msg) + + file_root1, file_ext1 = os.path.splitext(file_name1) + file_root2, file_ext2 = os.path.splitext(file_name2) + + if file_ext1 != file_ext2: + msg = 'Attempt to merge file names with different file extensions' + raise Exception(msg) + + parts = [] + # Split on separators + split_names = map(SPLIT_PATT.split, [file_root1, file_root2]) + # Pair segment and following separator + split_names = map(partial(nwise_longest, n=2, fillvalue="."), split_names) + + for (a, sep_a), (b, sep_b) in zip_longest(*split_names, fillvalue=("", "")): + if a is not None: + parts.extend([a, sep_a]) + if a != b and b is not None: + parts.extend([b, sep_b]) + + return os.path.join(dir_name1, ''.join(parts) + file_ext1[1:]) diff --git a/nuc_processing/splitFastqBarcodes.py b/nuc_processing/splitFastqBarcodes.py index 457e66a..475c249 100644 --- a/nuc_processing/splitFastqBarcodes.py +++ b/nuc_processing/splitFastqBarcodes.py @@ -1,5 +1,7 @@ import os, sys +from .common import open_file_r + def readNextFourLines(fp): @@ -22,66 +24,61 @@ def writeLines(fp, lines, barcodeLen): fp.write(lines[3][n:]) -def main(inputFile1, inputFile2, outputDirectory, barcodeLen=3): +def splitBarcodes(inputFile1, inputFile2, outputDirectory, barcodeLen=3): if not os.path.exists(outputDirectory): os.makedirs(outputDirectory) - fpin1 = open(inputFile1, 'rU') - fpin2 = open(inputFile2, 'rU') - - barcodeCount = {} - barcodeFp1 = {} - barcodeFp2 = {} - mismatched = 0 - matched = 0 - Ncount1 = 0 - Ncount2 = 0 - - lines1 = readNextFourLines(fpin1) - while lines1: - if lines1[0][0] != '@': - raise Exception('lines1[0] does not start with @: "%s"' % lines1[0].strip) - lines2 = readNextFourLines(fpin2) - if lines2[0][0] != '@': - raise Exception('lines2[0] does not start with @: "%s"' % lines2[0].strip) - - if lines1[1][barcodeLen] == 'N': - Ncount1 += 1 - - if lines2[1][barcodeLen] == 'N': - Ncount2 += 1 - - barcode1 = lines1[1][:barcodeLen] - barcode2 = lines2[1][:barcodeLen] - if barcode1 != barcode2: - mismatched += 1 - else: - matched += 1 - if barcode1 not in barcodeFp1: - fileName1 = os.path.join(outputDirectory, '%s_%s.fq' % (os.path.basename(inputFile1)[:-3], barcode1)) - fileName2 = os.path.join(outputDirectory, '%s_%s.fq' % (os.path.basename(inputFile2)[:-3], barcode2)) - fpout1 = open(fileName1, 'w') - fpout2 = open(fileName2, 'w') - barcodeFp1[barcode1] = fpout1 - barcodeFp2[barcode2] = fpout2 - barcodeCount[barcode1] = 0 - - fpout1 = barcodeFp1[barcode1] - fpout2 = barcodeFp2[barcode2] - barcodeCount[barcode1] += 1 - - writeLines(fpout1, lines1, barcodeLen) - writeLines(fpout2, lines2, barcodeLen) + with open_file_r(inputFile1) as fpin1, open_file_r(inputFile2) as fpin2: + barcodeCount = {} + barcodeFp1 = {} + barcodeFp2 = {} + mismatched = 0 + matched = 0 + Ncount1 = 0 + Ncount2 = 0 lines1 = readNextFourLines(fpin1) - - fpin1.close() - fpin2.close() - + while lines1: + if lines1[0][0] != '@': + raise Exception('lines1[0] does not start with @: "%s"' % lines1[0].strip) + lines2 = readNextFourLines(fpin2) + if lines2[0][0] != '@': + raise Exception('lines2[0] does not start with @: "%s"' % lines2[0].strip) + + if lines1[1][barcodeLen] == 'N': + Ncount1 += 1 + + if lines2[1][barcodeLen] == 'N': + Ncount2 += 1 + + barcode1 = lines1[1][:barcodeLen] + barcode2 = lines2[1][:barcodeLen] + if barcode1 != barcode2: + mismatched += 1 + else: + matched += 1 + if barcode1 not in barcodeFp1: + fileName1 = os.path.join(outputDirectory, '%s_%s.fq' % (os.path.basename(inputFile1)[:-3], barcode1)) + fileName2 = os.path.join(outputDirectory, '%s_%s.fq' % (os.path.basename(inputFile2)[:-3], barcode2)) + fpout1 = open(fileName1, 'w') + fpout2 = open(fileName2, 'w') + barcodeFp1[barcode1] = fpout1 + barcodeFp2[barcode2] = fpout2 + barcodeCount[barcode1] = 0 + + fpout1 = barcodeFp1[barcode1] + fpout2 = barcodeFp2[barcode2] + barcodeCount[barcode1] += 1 + + writeLines(fpout1, lines1, barcodeLen) + writeLines(fpout2, lines2, barcodeLen) + + lines1 = readNextFourLines(fpin1) + + # TODO: Can use ExitStack to manage files in Python3 for fpout1 in barcodeFp1.values(): fpout1.close() - for fpout2 in barcodeFp2.values(): fpout2.close() @@ -98,10 +95,17 @@ def main(inputFile1, inputFile2, outputDirectory, barcodeLen=3): print('barcode "%s" = %d (%.1f%%)' % (barcode, count, 100*count/total)) -if __name__ == '__main__': +def main(argv=None): + if argv is None: + argv = sys.argv[1:] + in_file_1, in_file2 = argv[:2] + if len(argv) == 3: + out_dir = argv[2] + else: + out_dir = os.path.dirname(os.path.abspath(in_file_1)) + + splitBarcodes(in_file_1, in_file2, out_dir) - in_files = sys.argv[1:] - in_file_1, in_file2 = in_files[:2] - out_dir = os.path.dirname(os.path.abspath(in_file_1)) - main(in_file_1, in_file2, out_dir) +if __name__ == '__main__': + main() diff --git a/nuc_processing/split_fastq_barcodes.py b/nuc_processing/split_fastq_barcodes.py index 274b424..9e43adb 100755 --- a/nuc_processing/split_fastq_barcodes.py +++ b/nuc_processing/split_fastq_barcodes.py @@ -820,7 +820,7 @@ def get_bc_file_name(path_root, bc_key, sample_names, nsn, file_ext): msg = '{} barcode: {} count {:,} ({:.2f}%)'.format(sample_names[bc_key], bc_key, nb, nb/float(100.0*n_reads)) info(msg) - _write_analysis_file(bc_counts, sample_names, analysis_file_path) + _write_analysis_file(bc_counts, sample_names, analysis_file_path) if __name__ == '__main__': diff --git a/setup.cfg b/setup.cfg index 39ebad3..0be28e1 100644 --- a/setup.cfg +++ b/setup.cfg @@ -1,9 +1,15 @@ -[tool:pytest] -flake8-ignore = +[flake8] +ignore = E401 E261 E111 E114 E129 - nuc_processing/test/*.py F403 F405 - nuc_processing/nuc_processing/*.py E501 E231 E228 E741 + E121 + E226 + W503 + W504 + + test/*.py F403 F405 + nuc_processing/*.py E501 E231 E228 E741 +max-line-length = 100 diff --git a/setup.py b/setup.py index a7a362f..3b9e369 100755 --- a/setup.py +++ b/setup.py @@ -1,12 +1,17 @@ #!/usr/bin/env python from setuptools import setup +import sys + +compat_pkgs = [] +if sys.version_info.major < 3: + compat_pkgs.append("pathlib2") setup( name="Nuc Processing", version="0.0.1", description="A program to generate contacts from Hi-C data", - install_requires=['numpy', 'scipy'], + install_requires=['numpy', 'scipy'] + compat_pkgs, packages=['nuc_processing'], include_package_data=True, entry_points={'console_scripts': [ diff --git a/test/fixtures/chr18.fa b/test/fixtures/chr18.fa new file mode 100644 index 0000000..3e99624 --- /dev/null +++ b/test/fixtures/chr18.fa @@ -0,0 +1,4097 @@ +>gi|372099092|ref|NC_000084.6| Mus musculus strain C57BL/6J chromosome 18, GRCm38.p2 C57BL/6J +NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN +NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN +NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN +NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN +NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN +NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN +NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN +NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN +NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN +NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN +NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN +NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN +NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN +NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN +NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN +NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN +NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN +NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN +NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN +NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN +NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN +NNNNNNNNNNGAATTCAGAGATTCAAGGCCTCCGCCTTCTAAGTGTTGGCTCCAAGAATCTGGTTTTGGG +AGGGGCTAAACTATCTGTTGAGAGCCGCTATCGTGCATGTCACGAGTTAGTCTTTTGGGAGAGGTGTTCA +GCAGCCACTGGTTCTATCTGTACCTTCAAAGTCGACACAAGGCTGGACTAACCTGAAGGAGTAAACAGGA +ATCCCAGGGAACACACAGTAGCCATGGAACACTTTCACCAAAGATAGATTCTGAAGGTCTATAAGGTAAG +ACAAACAGGTTTTTGTTTGTTTGTTTGTTTTGTTTTTGGCGTATCGGCACAGATACATTCAGAAACCAGA +GAAAGTTGGCATATCTGCAGATATTATAGTTATAGATGGTATTTCGCTGTTTGTTGTACTAAAACTAAGA +GATTGTCTCTGATTAGCAAATTCTGGAGTTTTGTTTTGTTTTTGATTTTGGTTATTCTCATCAAAGAAAT +TGTCTTGGAATGGATTGGGATTGTGAATTCCTTGTGCTCAGACTCTAGAATATGTGTATTTATATCTTCA +GTGAAATACAGTGTAGACTGGTACCAGAAAGTCTATTATTAACTTCCCTTTCCCTAGCCCACGGTTAATA +TAAAGGGAGGAATATTCCACTTGATAAGTAGGTTTGGAGCATTGTTATTGCTATCACTTGTGTGCTTCCC +TGCCTCTGTAATTTTCATATTCATACTCTGGAATCTGTAATTTCGGTAAAAGTTACTGGTGGCTGAAAGT +TTACTGTACTCAATTTCAGGGTGCAGCTGTTTGCACAGAAAGGCACTATTGTGCTAGATTAAAGTTTCAG +AACTTGGTAGAGTGAGGTTGTAATCTCTCATGTATGAATGCATTTCTTTAACAGGCATGCATTAACTTTT +ACATAAGTACTGTTGTGAAGCTCATTCATTAAAAAAAAAAAAACGAAAAACAAAAAAAACAGGAAAGATT +GTAAGTCCAAATCATGTCTTCCATTTTGCTCTTCTGTATTTCCTGACCACTTAGAAAACGTTCACAAGCC +TTTGAAGAAACAGCAGCAGGCAGTTATTGTTTTCAAGGGTTACAAAGTAAGTGCTTGATTTGTAATGTAT +TCTCTATCTACTGTTTTGATTTTCAGATTTTGACTCAATATTTGAAGATGAGCTTTTTATTGGATGATGT +TAATTCTCGAATGTAGTAATGTTGTTTCACAATTGTAATGTTACATGATCATGTGTGTGACATTCTCTGA +CAAATTATGCGATAAGAATGTCATTTTCATGGAACCCATGGCTCTGATTGCACAGTCCCCTTGCTAAAGC +AAAGGTCACTCTTTTTTTTATTATATATATATTTTTATTACGTATTTTTCTCAATTACACTTCCAATGCT +ATCCCAAAAGTCCCCCATACCCTCCCCCCACTCCCCTACCCACCCACTCCCACTTTTTGGCCCTGGCGTT +CCCCTGTACTGGGGTATATGAAGTTTGCAAGTCCAATGGGCCTCTCTTTCCAGTGATGGCCGACTAGGCC +ATCTTTTGATACATATGCAGCTAGAGTCAAGAGCTCCGGGGTACTGGTCAGTTCATAACGTTGTTGCACC +TACAGGGTTGCAGATCTCTTTAGCTCCTTGATTACTTTCTCTAGCTCTTCCATTGGGGGCCCTGTGATCC +ATCCAATAGCTGACTGTGAGCATCCACTTCTGTGTTTGCTAGGCCCCAGCATAGTCTCACAAGAGACAGC +TATATCAGGGTCCTTTCAGCAAAATCTTGGTAGTGTATGCAATGGTGTCATCGTTTGGAGGCTAATTATG +GGATGGATCCCTGGATATGGCAGTCTCTAGATGGTCCATCCTTTTGTCTCAGCTCCAAACTTTGTCTCTG +TAACTCCTTCCATGGGTGATTGTTTCCAATTCTAAGAATGGGCAAAGTGTCCACTTTGTTCTTCCTCAGT +TTCATGTGTTTTACAAATTGTCTCTTATATCTCGGATATACCAAATTTCTGGGCTAATATCCACTTATCA +GTGAGTACATATCATTTGAGTTCTTTTGTGATTGTGTTACCTCACTCAGGATGACGCCCTCCAGGTCCTA +CCATTTGTCTAGGAATTTCATAAATTCATTCTTTTTAATAGCTGAGTATTACTCCATTGTGTAAATGTAC +CACATTTTTGTATCCATTCCTCTGTTGAGGGGCATCTGGGTTCTTTCCAGCTTCTGGCTATTATAAATAA +GGCTGCTATGAACATAGTGGAGCATGTGTCCTTCTTACCGGTTGGGACATCTTCTGGATATATGCCCAGG +AGAGGTATTGCGGGATCCTCTGGTAGTACTATGTCAAAGGTACTATGTCTTTTAAGGCTACTTCAGAACT +GGTCTTTGTATTTTCTCTAAGTGATGGATGTAGTCATGTCTATTTAGAGGCAGGGTATCACATGTCACAG +GCAGCCATACATGTGTGCCATGAGAAAGTTCAAAGACTGTACCAAAGTCTGCAGGAACTCAAATTTTCAT +TTTTGTAATGCTAGCCCCCAAGATGTCCCTCCAAGAAATAAATTATTTTGTATTTTATAACTTAAAAAAA +AGAAAAGAAATACATTGTGGAAAATAATCCTGGTCCCTTACTCTCCTTGTTTCTGTAGAATCCACTGCTG +TAACTTTCTCCAATATCTCCATAGTCAGACTACTGACATGCATGAAAGGCTGTTGAAATTGTTTCAAACA 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